在進(jìn)行分析測試方面的研究時,一般采用移液器(pipette)量取少量或微量的液體。對于移液器的正確使用方法及其一些細(xì)節(jié)操作,是很多人都會忽略的。現(xiàn)在分幾個方面詳細(xì)敘述。
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時,用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液器。
移液的方法
移液之前,要保證移液器、管嘴和液體處于相同溫度。吸取液體時,四指并攏握住移液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,移液器保持豎直狀態(tài),將管嘴插入液面下2-3毫米,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,排液時吸頭接觸傾斜的器壁。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。最后按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。
兩種移液方法
1、一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第一停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。
2、二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第一停點排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的管嘴,棄之。
移液器正確放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液器架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器管嘴里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
移液器使用注意事項
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補(bǔ)償量,可由試驗確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸餾水20℃時重0.9982g。
(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機(jī)物等)。
(8)嚴(yán)禁使用移液器吹打混勻液體。
(9)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準(zhǔn)確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進(jìn)行操作。
(10)如不使用,要把移液器的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。
(11)最好定期清洗移液器,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。
(12)高溫消毒之前,要確保移液器能適應(yīng)高溫。
(13)校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來進(jìn)行。
(14)使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
1、管嘴是否匹配;
2、彈簧活塞是否正常;
3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機(jī)溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液。